Фитаза
  • Air ProФитаза

Фитаза

Фитазата трябва да се съхранява на сухо, хладно и добре проветриво място далеч от слънцето, топлината.

Изпратете запитване    PDF DownLoad

Описание на продукта


Приложение и принцип на фитазата

Тази процедура се използва за определяне на активността на ензимите, освобождаващи фосфат от фитат. Изследването се основава на ензимна хидролиза на натриев фитат при контролирани условия чрез измерване на количеството освободен ортофосфат.


Реактиви и разтвори 
[Забележка: Всички стъклени съдове трябва да бъдат измити с киселина, изплакнати и внимателно почистени, за да се гарантира липсата на фосфат.]
Ацетатен буфер (рН 5,5) Разтворете 1,76 g 100% оцетна киселина (C2H4O2), 30,02 g натриев ацетат трихидрат (C2H3O2Na · 3H2O) и 0,147 g калциев хлорид дихидрат в около 900 ml вода. Разтворът се прехвърля в мерителна колба от 1000 ml, разрежда се до обем с вода и се разбърква. РН трябва да бъде 5,50 ± 0,05.
Разтвор на субстрата Разтворете 8,40 g натриев фитат декахидрат (C6H6O24P6Na12 · 10H2O) (Sigma Chemical Co.) в 900 ml ацетатен буфер. Регулирайте рН до 5,50 ± 0,05 при 37,0 ° ± 0,1 ° чрез добавяне на 4 М оцетна киселина. Охладете до температурата на околната среда. Количествено прехвърлете сместа в мерителна колба от 1000 ml, разредете до обема с ацетатен буфер и разбъркайте. Приготвяйте прясно ежедневно.
Разтвор на азотна киселина (27%) По време на разбъркване бавно добавете 70 ml 65% азотна киселина към 130 ml вода.
Разтвор на амониев хептамолибдат Разтваря се 100 g амониев хептамолибдат тетрахидрат [(NH4) 6Mo7O24 · 4H2O] в 900 ml вода в мерителна колба от 1000 ml. Добавете 10 ml 25% разтвор на амоняк, разредете до обема с вода и разбъркайте. Този разтвор е стабилен в продължение на 4 седмици, когато се съхранява при стайна температура и е защитен от светлина.
Разтвор на амониев ванадат Разтворете 2,35 g амониев монованадат (NH4VO3) в 400 ml топла (60 °) вода. Докато разбърквате, бавно добавете 20 ml разтвор на азотна киселина (27%). Охладете до температурата на околната среда. Количествено прехвърлете сместа в мерителна колба от 1000 ml, разредете до обем с вода и разбъркайте. Този разтвор е стабилен в продължение на 4 седмици, когато се съхранява при стайна температура и е защитен от светлина.
Разтвор за оцветяване / спиране При разбъркване добавете 250 ml разтвор на амониев ванадат към 250 ml разтвор на амониев хептамолибдат. Бавно добавете 165 ml 65% азотна киселина. Охладете до температурата на околната среда. Количествено прехвърлете сместа в мерителна колба от 1000 ml, разредете до обем с вода и разбъркайте. Приготвяйте прясно ежедневно.
Разтвор на калиев дихидроген фосфат Изсушете достатъчно количество калиев дихидроген фосфат (KH2PO4) във вакуумна фурна при 100 ° до 104 ° за 2 часа. Охлажда се до стайна температура в ексикатор над изсушен силикагел.
В два екземпляра (разтвори А и В) се претеглят приблизително 0,245 g изсушен калиев дихидроген фосфат с точност до 1 mg и се разрежда с ацетатен буфер до 1 L, за да се получат разтвори, съдържащи 1,80 mmol / L калиев дихидроген фосфат.
Фитазен референтен препарат (силно концентриран фитазен препарат) Този препарат може да бъде получен от Gist-Brocades, Делфт, Холандия, с определена дейност (чрез съвместен анализ) или активността на референтния препарат може да бъде определена съгласно Процедура 2.
Референтни разтвори за фитаза, Процедура 1 Претеглете количество референтен препарат за фитаза, съответстващо на 20 000 единици фитаза, с точност до 1 mg в два екземпляра в 200-милилитров мерителни колби. Разтваря се и се разрежда до обема с ацетатен буфер и се разбърква. Разрежда се с ацетатен буфер, за да се получат разреждания, съдържащи приблизително 0,01, 0,02, 0,04, 0,06 и 0,08 фитазни единици на 2,0 ml от крайното разреждане.
Приготвяне на пробата, процедура 1 Суспендирайте или разтворете и разредете точно претеглените количества проба в ацетатен буфер, така че 2,0 ml от крайното разреждане да съдържа между 0,02 и 0,08 фитазни единици.

Приготвяне на пробата, процедура 2 В два екземпляра, претеглете точно количества от референтния препарат за фитаза и разтворете и разредете в ацетатен буфер, за да се получат разреждания, съдържащи 0,06 ± 0,006 фитазни единици на 2,0 ml от крайното разреждане.


Процедури
Процедура 1 (Определяне на фитазната активност) Прехвърлете 2,00 ml от приготвянето на пробата, процедура 1 и референтните разтвори на фитаза, процедура 1, в отделни стъклени епруветки с размери 20 × 150 mm. С помощта на хронометър и стартиране в момент, равен на нула, в реда на поредицата и на редовни интервали от време, поставете тръбите във водна баня 37,0 ° ± 0,1 ° и оставете съдържанието им да се уравновеси за 5 минути. По време, равно на 5 минути, в същия ред на серията и със същите интервали от време, добавете 4,0 ml субстратен разтвор (предварително уравновесен до 37,00 ± 0,10) към всяка епруветка. Смесете и заменете във водна баня с температура 37,0 ° ± 0,1 °. По време, равно на 65 минути, в същия ред и през същите интервали от време, прекратете инкубацията, като добавите 4,0 ml разтвор Color / Stop. Смесете и охладете до стайна температура.
Пригответе заготовки, като прехвърлите 2,00 ml от приготвянето на пробата, Процедура 1 и Референтните разтвори на фитаза, Процедура 1, в отделни стъклени епруветки с размери 20 × 150 mm. С помощта на хронометър и стартиране в момент, равен на нула, в реда на поредицата и на редовни интервали от време, поставете тръбите във водна баня 37,0 ° ± 0,1 ° и ги оставете да се уравновесят за 5 минути. На време равно на 5 минути, в същия ред на поредицата и в рамките на същите интервали от време, добавете 4,0 ml разтвор за цвят / стоп. Смесете и охладете до стайна температура. След това добавете 4,00 ml субстратен разтвор към празните епруветки и разбъркайте.
Центрофугирайте всички епруветки за 5 минути при 3000 × g. Определете абсорбцията на всеки разтвор при 415 nm в 1-сантиметрова клетка с дължина на пътя с подходящ спектрофотометър, използвайки вода за нулиране на инструмента.
Процедура 2 (Определяне на фитазната активност на референтния препарат за фитаза) Прехвърлете 2,00 ml приготвяне на пробата, процедура 2 и 2,00 ml (три пъти от разтвор на калиев дихидроген фосфат A и два пъти от B) разтвори на калиев дихидроген фосфат в отделни 20 - × 150 mm стъклени епруветки. С помощта на хронометър и стартиране в момент, равен на нула, в реда на поредицата и на редовни интервали от време, поставете тръбите във водна баня 37,0 ° ± 0,1 ° и оставете съдържанието им да се уравновеси за 5 минути. По време, равно на 5 минути, в същия ред на поредицата и през същите интервали от време, добавете 4,0 ml субстратен разтвор (предварително уравновесен до 37,0 ° ± 0,1 °) към епруветките. Смесете и заменете във водна баня с температура 37,0 ° ± 0,1 °. По време, равно на 35 минути, в същия ред и през същите интервали от време, прекратете инкубацията, като добавите 4,0 ml разтвор Color / Stop Смесете и охладете до стайна температура.

Пригответе заготовки, като прехвърлите 2,00 ml приготвяне на пробата, процедура 2, в отделни 20- × 150 mm стъклени епруветки. Пригответе заготовки за реагенти, като прехвърлите 2,00 ml вода в серия от пет отделни 20- × 150 mm стъклени епруветки. Добавете 4,0 ml разтвор за оцветяване / стоп към всички празни епруветки и разбъркайте. След това добавете 4,0 ml субстратен разтвор и разбъркайте. Определете абсорбцията на всеки разтвор при 415 nm в 1-сантиметрова клетка с дължина на пътя с подходящ спектрофотометър, използвайки вода за нулиране на инструмента.


Изчисления
Изчисляване, процедура 1 Една фитазна (фитазна) единица (FTU) е количеството ензим, което освобождава неорганичен фосфат при 1 µmol / min от натриев фитат 0,0051 mol / L при 37,00 при pH 5,50 при условията на теста. Изчислете коригираната абсорбция (проба минус празна проба) за всяко приготвяне на пробата и референтен разтвор на фитаза. Нанесете точно изчислената фитазна активност (FTU на 2 mL) на всеки референтен разтвор на фитаза спрямо съответната абсорбция. От кривата определете фитазната активност във всяка подготовка на пробата (FTU на 2 ml):

Активност (FTU / g) = (FTU на 2 ml × разреждане) / тегло на пробата (g).


Изчисляване, Процедура 2 Изчислете коригираните абсорбции AR за всяка подготовка на пробата (референтен разтвор на абсорбция на фитаза минус съответната абсорбционна проба) и за всеки разтвор на калиев дихидроген фосфат, Ap (абсорбция на разтвор на калиев дихидроген фосфат минус средна абсорбция на реагент). Изчислете C, концентрацията на фосфат на всеки разтвор на калиев дихидроген фосфат:

(W-1000-1-2) / MW = C (mmol / 2 mL).

Изчислете абсорбциите D за всеки разтвор на калиев дихидроген фосфат след корекция за претегленото количество калиев дихидроген фосфат:

Ap / C = D (абсорбционни единици / mmol фосфат на 2 ml).

Изчислете средната стойност на резултатите D, давайки E (максимално допустима разлика, 5%).
Изчислете активността за всеки референтен препарат за фитаза:

(AR × f) / (30 × R × E) = FTU / g,

в която AR е равно на коригираната абсорбция на стандартния разтвор на фитаза; f е равен на общия коефициент на разреждане на референтния препарат; 30 е равно на времето на инкубация, в мин; R е равно на теглото на пробата, в g; E е равно на средната стойност на D фактори; W е равно на теглото на калиев дихидроген фосфат, в g; и MW е равно на молекулното тегло на калиев дихидроген фосфат, 136.09 (g / mol).


СЕРТИФИКАТ ЗА АНАЛИЗ


Име на продукта Фитаза    
Друго име Неприложимо Страна на произход Китай
Щам Aspergillus niger Дата на производство ОКТ. 17 2019
Партиден номер SS19101701 Срок на годност ОКТ. 16 2021
Пакет 25 кг / кофа Количество /
ПРОТОКОЛ СПЕЦИФИКАЦИИ РЕЗУЛТАТИ МЕТОД
ФИЗИЧЕН И ХИМИЧЕН АНАЛИЗ
Описание Светложълта до светлокафява течност Спазва Визуално
Миризма и вкус Характерна миризма и вкус Спазва Вкус
Влага NMT 7% 4,5% Анализатор на влага
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Дейност, която може да се идентифицира Положително за Маназа активност Спазва В къщата
ДЕЙНОСТ
Декстраназна активност NLT 5000 FTU / g 5 068 FTU / g FCC
МИКРОБИОЛОГИЧНИ
Общ брой на бактериите
Колиформни бактерии (CFU / g)
Плесени и дрожди
E.Coli
Салмонела
Стафилококус ауреус
Pseudomonas aeruginosa
NMT 3 000 CFU / g
NMT 30 CFU / g
NMT 100 CFU / g
Отсъстващ
Отсъстващ
Отсъстващ
Отсъстващ
<100
<10
<10
Не се открива
Не се открива
Не се открива
Не се открива
FDA BAM Онлайн Ch.3
FDA BAM Онлайн Ch.4
FDA BAM Онлайн Ch. 2
FDA BAM Онлайн Ch.4
FDA BAM Онлайн Ch.5
FDA BAM Онлайн Ch.12
AOAC
ТЕЖКИ МЕТАЛИ
Водя
живак
Кадмий
Арсен
NMT 3 ppm
NMT 0,1 ppm
NMT 1 ppm
NMT 1 ppm
<3 ppm
± 0,1 ppm
<1 ppm
<1 ppm
USP <231>
USP <231>
USP <231>
USP <231>
Съхранение: Съхранявайте на хладно и сухо място, защитено от светлина, дръжте барабана близо, когато не се използва.
Заключение: Съответства на стандартите на FCC. Срок на годност: Срокът на годност при предписани условия на съхранение и херметична опаковка ще бъде 2 години.
Продуктът СЪОТВЕТСТВУВА с гореспоменатите спецификации
Одобрен от RICKY H. ZHU Упълномощен подписващ

Опаковане и съхранение

Опаковъчна торбичка за твърда храна, 25 кг / цев.


Фитазата трябва да се съхранява на сухо, хладно и добре проветриво място далеч от слънцето, топлината.

Плащане:T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, e-Checking, Pay Later, LC и др.

Горещи маркери: Phytase, Производители, Доставчици, Търговия на едро, Купуване, Фабрика, Персонализирани, На склад, Насипни, Безплатни мостри, Марки, Китай, Произведено в Китай, Евтино, Отстъпка, Ниска цена, Купете отстъпка, Цена, Ценова листа, Предложение, GMP, Качество , Последни продажби, Две години срок на годност

Свързана категория

Изпратете запитване

Моля, прочетете формата си по-долу. Ще ви отговорим в рамките на 24 часа.